產品介紹Introduction
產品介紹
ExpressCast PAGE彩色凝膠快速試劑盒是種采用上層膠和下層膠的新型預混液,在傳統凝膠配方基礎上進行了優化,僅加入改進型促凝劑即可制膠,無加TEMED,避免惡臭氣味。不僅簡化和縮短凝膠配制步驟和時間,而且兼容傳統的Laemmli體系中的Tris-Glycine 電泳緩沖液,可以在高電壓下快速完成蛋白電泳。上層膠的緩沖液中加入了紅色指示劑,使加樣孔清晰可見,方便加樣。
產品特色
① 僅加入改進型促凝劑即可,無加TEMED,避免惡臭氣味
②制備紅色的上層膠,膠孔清晰可辨,方便加樣
③ 縮短凝膠電泳時間,150V條件下,40-60分鐘即可完成電泳
④ 兼容傳統的Tris-Glycine電泳緩沖液, 穩定性好,分辨率高,條帶更加清晰
操作步驟
()下層膠配制:以10%分離膠,制膠厚度1.0mm為例
1. 分別量取等體積的下層膠溶液2.5ml和下層膠緩沖液2.5ml,輕柔混。
2. 加入50ul改進型促凝劑至上述混合液中,混。
3. 將配制好的溶液,灌入制膠板內, 加入適量的醇或水,壓平分離膠,待下層膠凝固后(5-15分鐘),棄去上層水或醇,用濾紙吸取多余的水或醇。
(二)上層膠配制
1. 分別量取等體積的上層膠溶液0.75ml和彩色上層膠緩沖液0.75ml,輕柔混。
注意:由于紅色顏料的理化性質,使用前請搖。
2. 加入15ul改進型促凝劑至上述混合液中,混。
3. 將配制好的溶液, 灌入制膠板內,緩慢插入梳子。
4. 待上層膠凝固后(10-15分鐘),取出梳子,上樣, 在Tris-Glycine電泳緩沖液體系中, 電壓150V, 電泳40-60分鐘。
注意事項:
1. 丙烯酰胺有神經毒性,請穿戴實驗服及口罩經行相關的實驗,若是不小心濺到身體上,請及時用流水清洗,若有要,請前往醫院咨詢醫生處理。
2. 本品因加入紅色顏料,上層膠對樣品沒有濃縮效果,經過內部成分的優化,與傳統凝膠相比,對蛋白條帶分離效果更好,分辨率更高,蛋白條帶更窄更銳利。
3. 改進型促凝劑的用量僅供參考,量越多的促凝劑可加速凝膠,反之亦然;凝膠速度與溫度成顯著正相關,溫度越高凝膠速度越快,溫度越低凝膠速度越慢,實際用量可根據個人實驗習慣經驗及環境適當調整。
4. 本產品已加入適量的TEMED替代品,如要進步提高凝膠速度,灌膠前溶液中可按補充適量TEMED。
5. 為避免凝膠中氣泡的形成,建議在配膠之前,使膠溶液及緩沖液平衡到室溫(如室溫放置幾分鐘)。
6. 本產品僅用于科學研究。