【保存條件】
室溫保存,有效期1年
【概述】
SuperBlot免冰浴快速轉膜液是種改良的Towbin經典緩沖液,這種專有的配方大大提高了轉移速度,而不會產生過多的熱量而影響蛋白質。SuperBlot免冰浴快速轉膜液般不要額外添加甲醇/乙醇或SDS,但它與這些添加劑兼容(可添加甲醇/乙醇0-20%),當分子量大于130KD時建議添加10-20%甲醇或乙醇。
【操作方法】
1. 使用前用去離子水將20×SuperBlot免冰浴快速轉膜液釋至1×工作液,例如將50ml 20×SuperBlot免冰浴快速轉膜液加入950ml去離子水中混。(如分子量大于130KD,可以添加100ml-200ml乙醇,如取100ml 10×SuperBlot蛋白電泳快速轉膜液加入700ml-800ml去離子水與100ml-200ml 乙醇混備用)
2. 做好轉印三明治結構,然后轉移至電泳槽中,設定恒流 400 mA,大約時間15-30分鐘完成蛋白轉膜。
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膠濃度 |
6% |
8% |
10% |
12% |
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推薦轉膜時長 |
15分鐘 |
20分鐘 |
30分鐘 |
35分鐘 |
【注意事項】
1. PVDF膜提前使用甲醇浸泡30秒以上。
2. 轉印電流建議設定恒流400mA, 般25-30分鐘可以將150kD以下蛋白完全轉印;小于100kD蛋白20分鐘即可完全轉印;對于大于150kD蛋白,建議延長5-10分鐘。
3. 凝膠的濃度影響轉印的效率,對于膠濃度8%,20分鐘即可完成轉印;對于膠濃度10%,25-30分鐘即可完成轉印;對于膠濃度大于 10%,建議延長5-10分鐘
4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴次性手套操作。
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